【摘 要】
目的:采用多種方法探究天然植物抗菌液(PAMs)對(duì)人肝癌細(xì)胞HEPG-2的殺傷及初步分子作用機(jī)理。方法:運(yùn)用形態(tài)學(xué)觀察、MTT法測(cè)定PAMs對(duì)HEPG-2的抑制作用,AO/EB細(xì)胞雙染、Annexin V-FITC/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PAMs作用于HEPG-2細(xì)胞后細(xì)胞的凋亡情況,再通過(guò)q RT-PCR與western blot檢測(cè)HEPG-2中相關(guān)基因在m RNA水平和蛋白水平的表達(dá)量變化。最后利用劃痕實(shí)驗(yàn)和transwell小室檢測(cè)PAMs對(duì)HEPG-2細(xì)胞遷移能力的抑制。結(jié)果:PAMs可以抑制和殺傷HEPG-2細(xì)胞,作用效果呈濃度和時(shí)間依賴性,且與細(xì)胞的凋亡途徑密切相關(guān)。PAMs可下調(diào)HEPG-2細(xì)胞中foxm1、survivin、bcl-2的m RNA表達(dá)水平,同時(shí)在蛋白水平下調(diào)foxm1的表達(dá)量,上調(diào)p53的表達(dá)量。除此之外,PAMs還能夠有效地抑制HEPG-2細(xì)胞的體外遷移。結(jié)論:PAMs殺傷HEPG-2細(xì)胞的途徑之一是通過(guò)下調(diào)foxm1、上調(diào)p53基因的表達(dá)量,從而抑制或減少其下游靶基因survivin和bcl-2的轉(zhuǎn)錄表達(dá),促進(jìn)細(xì)胞凋亡。本研究為基于PAMs抗癌創(chuàng)新民族醫(yī)藥的研發(fā)提供了重要的前期工作基礎(chǔ)。